Dirección general de educacióN




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SEP SEMS

DIRECCIÓN GENERAL DE EDUCACIÓN

TECNOLÓGICAc:\users\owner\desktop\cámara\fotos\100_1595.jpgc:\users\owner\desktop\cámara\fotos\100_1584.jpg

INDUSTRIAL




PRÁCTICAS

DE

BIOQUÍMICA

Técnico Laboratorista Clínico

Semestre VI

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CENTRO DE BACHILLERATO TECNOLÓGICO

Industrial de servicios 33

LEONA VICARIO

SAN LUIS R.C., SONORA MÉXICO


No

PRACTICA

PAG.

REVISADO

1

OBTENCIÓN DE UN ALQUINO


3




2

ÉSTERES


5




3

ESTRUCTURA Y FUNCION DE LA CELULA


7




4

ESTRUCTURA CELULAR


8




5

CARBOHIDRATOS


9




6

POLISACÁRIDOS


11




7

PROTEÍNAS


12




8

ENZIMAS Y METABOLISMO


14




9

LIPIDOS DE LA FOTOSÍNTESIS


15




10

ÁCIDOS NUCLÉICOS


16





Práctica No. 1

OBTENCIÓN DE UN ALQUINO

INTRODUCCIÓN

Alquinos son compuestos formados con carbono e hidrogeno, en donde cuando menos se encuentran un enlace triple entre carbonos
Ejemplo:
H-C C-H

OBTENCIÓN DE ACETILENO O ETINO:
MATERIAL Y REACTIVOS:

Matraz de destilación

Embudo de separación con llave

Balanza granataria

Soporte con anillo

Pinzas para tubo de ensaye

Vaso de pp. de 50 ml.

Pinzas para matraz

3 Tubos de ensaye medianos c/tapón

Cerillos

Cuba hidroneumática

Tubo de desprendimiento

Papel encerado

Tela de asbesto

Pipeta de 10ml.

Espátula

Jabón, franela

Tapón de hule monohoradado

Gradilla

Acetiluro de calcio (carburo de calcio)

Agua


PROCEDIMIENTO:

  1. En una balanza granataria y sobre papel encerado pese 4 gr. de Acetiluro de Calcio en trozos (no en polvo); después introdúzcalo en un matraz de destilación bien seco.




  1. Ensamble un aparato como lo indica la figura.




  1. En el embudo de separación vierta 10ml. de agua destilada con una pipeta.




  1. Prepare 3 tubos de ensaye invertidos llenos de agua para colectar el gas, que se obtendrá por desplazamiento de agua en una cuba hidroneumática.




  1. Abra la llave del embudo, dejando gotear lentamente el agua.




  1. Descarte los dos primeros tubos porque contienen una mezcla de aire y gas (el etino forma mezclas explosivas con el aire). Huela su contenido lejos de cualquier fuente de calor, y anote sus observaciones




  1. Saque verticalmente y rápido cada uno de los tubos de ensaye llenos de gas y tápelos con un tapón de hule.




  1. Sostener con una pinza el tubo con gas en forma invertida, enseguida inflame el gas con precaución usando una astilla con punto de ignición.




  1. Anote sus observaciones:


obtencion de un alquinio-2

EJERCICIOS:

Escribe el 2 butino y el 1 pentino



Nombre del estudiante:




Q.F.B. Dinora Bernal Iribe

Revisado Fecha:

Práctica No. 2

ÉSTERES

INTRODUCCION:

Los ésteres son empleados en muchos y variados campos del comercio y de la industria, como los siguientes:





  • Disolventes

  • Plastificantes

  • Aromas artificiales

  • Productos Farmacéuticos

  • Repelentes de insectos

  • Aditivos Alimentarios





Muchos de los ésteres de bajo peso molecular tienen olores característicos a fruta: plátano (acetado de isoamilo), ron (propionato de isobutilo) y piña (butirato de butilo). Además se utilizan en la fabricación de aromas, perfumes sintéticos y aditivos alimentarios, por ejemplo, en caramelos y otros alimentos que han de tener un sabor afrutado.

Productos de uso tan frecuente como los analgésicos se fabrican con ésteres.

Todos los repelentes de insectos que podemos encontrar en el mercado contienen ésteres.

OBTENCIÓN DE UN ÉSTER
MATERIAL R REACTIVOS:

1 Vaso de pp. de 500ml.

1 vasos de pp. 100 ml.

Varilla de vidrio

1Tripié, maya de asbesto

Balanza

Ácido Salicílico

1 tubo de ensaye grandes

Papel encerado

Etanol

3 pipetas de 10ml.

Espátula

Ácido sulfúrico

Estos compuestos surgen de la unión de un ácido carboxílico y un alcohol, implicando la eliminación de una molécula de agua.
Ejemplo.

R – C O O H + H O – R R – C O O– R
Acido alcohol Ester
Reacción:
R – C O O H + H O – R R – C O O– R

Se elimina agua y se agrega acido sulfúrico (H2 SO4) como catalizador






PROCEDIMIENTO:

  1. En un tubo de ensaye introduzca 1 gr. de ácido Salicílico previamente pesado en una balanza granataria y sobre un papel encerado, añada 6ml. de Etanol anhidro y disuelva el ácido agitando el contenido del tubo con una varilla de vidrio, cuando todo el sólido se haya disuelto agregue lentamente (con precaución) 1ml. de acido sulfúrico concentrado resbalándolo por las paredes internas del tubo.

  2. Caliente en baño María hasta ebullición el tubo de ensaye durante 4 minutos.




  1. Transcurrido este tiempo, vierta el contenido del tubo de ensaye de la siguiente manera:

  2. Con precaución huela el contenido del vasos, abanicando los vapores con la mano hacia su nariz



oliendo reactivos
1 2 3 4

  1. Anote sus observaciones y escribe la fórmula del producto obtenido.



Nombre del estudiante:




Q.F.B. Dinora Bernal Iribe

Revisado Fecha:


Práctica No. 3

ESTRUCTURA Y FUNCION DE LA CELULA
PEQUEÑOS ORGANISMOS
MATERIAL Y REACTIVOS

Portaobjetos

Yodo (Isodine)

Agua estancada

Cubreobjetos

Microscopio

Jabón

Palillos de dientes

Lama verde

Franela

Levadura en polvo p/panificación

Tortilla o naranja con hongos


PROCEDIMIENTO:

  1. Tome un poco de la lama que se forma en las paredes de las pilas de agua y colóquelo en un portaobjetos, coloque un cubreobjetos encima y observe al microscopio.

  2. Tome un poco de sedimento de agua estancada y póngalo en un portaobjetos, coloque el cubreobjetos y observe al microscopio.

  3. Ponga un poco de levadura en un vaso que contenga agua tibia, mezcle y coloque una gota en un portaobjetos, coloque un cubreobjetos y observe al microscopio.

  4. Raspe con un palillo el crecimiento del hongo y colóquelo sobre una gota de yodo en un portaobjetos, coloque encima un cubreobjetos y observe al microscopio.



EXPLICACION:

En la lama y el agua estancada se desarrolla una gran variedad de algas (seres unicelulares y pluricelulares) y protozoarios (organismos unicelulares), donde se identifican organelos como: membrana, núcleo, citoplasma, cloroplastos, etc.

La levadura (hongo unicelular) que se utiliza para panificación se activa al contacto con agua caliente, siendo posible observar células en reproducción por Gemación y organelos como membrana y citoplasma.

En alimentos como pan, tortilla, papa, queso, naranja, limón, etc., pueden desarrollarse hongos filamentosos multicelulares de variados colores en los que se pueden observar los organelos celulares.
ESCRIBE Y DIBUJA TUS OBSERVACIONES:


Nombre del estudiante:




Q.F.B. Dinora Bernal Iribe

Revisado Fecha:

Práctica No.4

ESTRUCTURA CELULAR
MODELO DE MEMBRANA CELULAR
MATERIAL:

5 a 6 pasas

1 recipiente

Agua


PROCEDIMIENTO:

  1. Coloque en el recipiente un poco de agua.

  2. Coloque las pasas en el agua.

  3. Después de 30 minutos observe el resultado.

¿Qué sucede con las pasas?

¿Entra o sale agua?

¿Qué parte de la pasa representa la membrana celular?

EXPLICACIÓN:

Aunque las pasas no están formadas de una sino de muchas células, esta actividad nos permite observar como el agua es capaz de viajar a través de sus membranas.

En el experimento, las pasas se hinchan debido a la entrada de agua y se observa además desprendimiento de oxígeno.

ESCRIBE TUS COMENTARIOS Y OBSERVACIONES:


Nombre del estudiante:




Q.F.B. Dinora Bernal Iribe

Revisado Fecha:


Práctica No. 5

CARBOHIDRATOS
   glumaterial

INTRODUCCIÓN

Los carbohidratos son compuestos orgánicos de importancia vital para los seres vivos, porque son la fuente principal de energía. Son llamados también glúcidos o azúcares, debido a que la mayoría de éstos compuestos se caracterizan por su sabor dulce. Se les puede encontrar principalmente en alimentos de origen vegetal como las frutas y verduras.



IDENTIFICACIÓN DE GLÚCIDOS

Para su identificación se utiliza un reactivo químico conocido como reactivo de Felhing o Benedict, el cual son de color azul debido a la presencia de iones de cobre que contiene disueltos en solución. Si se pone en contacto el reactivo de Felhing con un azúcar y se somete a calentamiento en baño maría por 5 minutos, se presenta cambio de color azul a rojo ladrillo, éste cambio nos indica que la muestra tiene carbohidratos.



MATERIALES Y REACTIVOS:

Glucosa

Almidón

Espátula

Maltosa

Gradilla

Vaso para calentar de 200 ml

Lactosa

5 tubos de ensayo

Mechero, tripié, malla, agitador

Sacarosa

2 pipetas de 5 ó 10 ml.

Reactivo de Felhing A y B





.


REACCIÓN DE FELHING:

FUNDAMENTO: Se basa en el carácter reductor de los monosacáridos y de la mayoría de los disacáridos (excepto la sacarosa). Si el glúcido que se investiga es reductor, se oxidará dando lugar a la reducción del sulfato de cobre (II), de color azul, a óxido de cobre (I), de color rojo-anaranjado.
PROCEDIMIENTO:

  1. Tomar la muestra que se quiera analizar (normalmente de 2 ml.)

  2. Añadir 1 ml. de Felhing A y 1 ml. de Felhing B.

A: (8.66 gr. de CuSO4 pentahidratado y aforar a 125 ml.)

B: (15 gr. De NaOH y 43.25 gr de tartrato de sodio y potasio aforando con agua hasta 125 ml.)

  1. El líquido del tubo de ensayo adquirirá un fuerte color azul.

  2. Calentar el tubo al baño María o directamente en un mechero de Laboratorio.

  3. La reacción será positiva si la muestra se vuelve de color rojo-ladrillo.

  4. La reacción será negativa si la muestra queda azul, o cambia a un tono azul-verdoso.

glufehling4

PROBLEMA:
¿Cómo demostrarías experimentalmente que una de las muestras es light?

Resultados:

Escribe la clasificación de los carbohidratos:


Nombre del estudiante:




Q.F.B. Dinora Bernal Iribe

Revisado Fecha:

Práctica No. 6

POLISACÁRIDOS

INTRODUCCIÓN

Los polisacáridos se caracterizan por contener gran cantidad de unidades de monosacáridos, los principales son almidón, glucógeno y celulosa, esta última se encuentra en la corteza de las plantas, con la cual se puede fabricar telas de lino, algodón y papel.
ESCRITURA MÁGICA
MATERIAL Y REACTIVOS:

1 Recipiente de plástico

1 Vaso de precipitado de 50 ml

1 Limón

Solución de Iodo (lugol)

1 Pincel o cotonete

Jabón y franela

1 Hoja de papel blanca

Agua


PROCEDIMIENTO:

  1. Vierta en un recipiente de plástico 1/2 taza de agua. Agregue 10 gotas de lugol al agua y agita.

  2. Obtenga el jugo de un limón en un vaso de precipitado de 5 ml. Escriba un mensaje con el jugo de limón en una hoja de papel blanca, ayudándose con pincel.

  3. Deje secar el jugo que permanece en el papel.

  4. Cuando la hoja esté completamente seca sumérjala en la solución de yodo preparada al inicio ¿Qué fue lo que ocurrió?


¿PORQUE?:
EXPLICACIÓN LO QUE OCURRIÓ

Las hojas de papel están hechas de celulosa. La celulosa al igual que el almidón es un polisacárido, y aunque tienen diferente configuración, son muy similares, por lo que ambos en presencia de yodo tienen la característica de tomar un color azul violeta muy similar.


Nombre del estudiante:




Q.F.B. Dinora Bernal Iribe

Revisado Fecha:


Práctica No. 7

PROTEÍNAS


INTRODUCCIÓN:

Las proteínas, debido al gran tamaño de sus moléculas, forman con el agua soluciones coloidales. Estas soluciones pueden precipitar con formación de coágulos al ser calentadas a temperaturas superiores a los 70: C o al ser tratadas con soluciones salinas, ácidos, alcohol, etc.

La coagulación de las proteínas es un proceso irreversible y se debe a su desnaturalización por los agentes indicados, que al actuar sobre la proteína la desordenan por la destrucción de su estructura terciaria y cuaternaria


1.- COAGULACIÓN DE PROTEÌNAS

2.- DESNATURALIZACION DE PROTEINAS
MATERIAL Y SUSTANCIAS:

3 vasos de precipitado de 50 ml.

1 huevo

Alcohol etílico

agua

pipeta de 10 ml.

1 tubo de ensaye

Pinzas/ tubo de ensaye

Acido acético

Mechero

Cerillos


1.- COAGULACIÓN DE PROTEÌNAS

Para ver la coagulación de las proteínas se puede utilizar clara de huevo, para conseguir más volumen puede prepararse para toda la clase una dilución de clara de huevo en agua, de forma que quede una mezcla aún espesa.
PROCEDIMIENTO:

  1. Colocar en un tubo de ensayo una pequeña cantidad de clara de huevo.

  2. Añadir 5 gotas de ácido acético y calentar el tubo a la llama del mechero.

http://www.arrakis.es/~rfluengo/imagenes/pcoagula.jpg

2.- DESNATURALIZACION DE PROTEINAS
PROCEDIMIENTO:

Coloque en un vaso de precipitado de 50 ml, 10 ml de Alcohol etílico y agregue la misma cantidad de agua. En otro vaso de precipitado de 50 ml vierta Alcohol etílico igual que el caso anterior, pero en vez de agua agregue la clara de un huevo ¿Qué observa? ¿De acuerdo a lo que observó en cuál de los puntos de este experimento hubo un cambio químico?
EXPLICACIÓN:

Un cambio químico involucra la desaparición de una o más sustancias puras y la aparición de una o más sustancias nuevas. La clara del huevo en presencia de Alcohol etílico sufre un cambio químico, ya que su estructura química se ve alterada. Dicho cambio se le llama desnaturalización y es debido a la presencia de proteínas en la clara de huevo.

Existen diversos agentes que ocasionan la desnaturalización de proteínas además del alcohol, por ejemplo los ácidos y el calor.

http://www.arrakis.es/~rfluengo/imagenes/desnaturalizacion.jpg











OBSERVACIONES Y CONCLUSIONES:




Nombre del estudiante:




Q.F.B. Dinora Bernal Iribe

Revisado Fecha:


Práctica No. 8

ENZIMAS Y METABOLISMO

INTRODUCCIÓN

Las enzimas son los catalizadores de toda reacción metabólica en los organismos vivos y estas ejercen su acción metabólica en unas moléculas llamadas sustratos.
MATERIAL Y SUSTANCIAS:

1 trozo de hígado de pollo o res

1 matraz Erlenmeyer

1 palillo de madera

Cerillos

Papel aluminio

50 ml. de agua oxigenada (peróxido de hidrógeno)


PROCEDIMIENTO:

Observe la acción de la enzima CATALASA, presente en los alimentos, sobre el peróxido de hidrógeno:


  1. Vierta el agua oxigenada sin diluir en el matraz, añada el hígado y cierre el frasco perfectamente con el papel aluminio. ¿Qué sucede con el hígado?

¿A qué se debe?

  1. Después de 3 minutos, encienda el palillo con los cerillos y apáguelo.

  2. Inmediatamente introduzca dentro del frasco el palillo con el punto de ignición generado.

¿Qué observa?

¿Cómo sabemos cuál es el gas que se está desprendiendo?

¿Cómo evita la catalasa la destrucción de las células?

¿Podría existir la vida sin las enzimas?, ¿Por qué?

¿Qué otro material podría utilizar en este experimento en lugar del hígado?
EXPLICACION:

Las células producen en su interior miles de enzimas, como la catalasa la cual actúa sobre el peróxido de hidrógeno, sustancia que se produce como resultado de algunas reacciones químicas celulares. El peróxido de hidrógeno es una sustancia muy tóxica que puede destruir rápidamente a la célula; sin embargo, esto no ocurre porque la catalasa desdobla el peróxido de hidrógeno en oxígeno y agua. Su efectividad es tal que una sola molécula de catalasa es capaz de desdoblar 5 millones de moléculas de peróxido de hidrógeno en un minuto a 0 ºC de temperatura.

La enzima CATALASA del hígado al tener contacto con el peróxido de hidrógeno, rompe la molécula liberando oxígeno; durante la reacción salen burbujas a la superficie pero la tapa del frasco impide que estas salgan quedando el gas dentro.

Al introducir el palillo en el frasco, éste arde porque hay una gran cantidad de oxígeno dentro del frasco, mucho más que en el exterior del mismo. La sustancia sobre la cuál actúa la enzima se llama sustrato, en este caso el peróxido de hidrógeno es el sustrato de la enzima catalasa.


Nombre del estudiante:




Q.F.B. Dinora Bernal Iribe

Revisado Fecha:


Práctica No. 9

LIPIDOS DE LA FOTOSÍNTESIS

INTRODUCCIÓN:

Los lípidos son compuestos insolubles en agua y solubles en disolventes orgánicos como cloroformo, benceno, éter etílico, acetona etc. Son producidos en la naturaleza por organismos animales y vegetales, formando parte de los tejidos.

LAS GRASAS EN LOS ALIMENTOS

MATERIAL Y REACTIVOS:

1 cacahuate

1 manzana

1 plátano

1 hoja de papel

2 recipientes

2 cucharadas de aceite

Matraz c/mano

gotero





PROCEDIMIENTO:

  1. Divida la hoja en cuatro y escriba el nombre de cada uno de los alimentos que va a usar.

  2. Machaque por separado un poco de manzana, cacahuate y plátano.

  3. Coloque en el papel, sobre el cuadro correspondiente, una pequeña cantidad de los alimentos machacados. En el caso del aceite ponga una gota, deje que se extienda un poco y limpie con cuidado el exceso.

  4. Espere unos minutos y observe el papel contra la luz. ¿Qué diferencias encuentra entre las manchas dejadas por cada alimento?

¿En qué casos la mancha es translúcida y en cuáles opaca?

¿En qué tipo de mancha se observa la presencia de grasas?

¿Qué alimento contiene más grasa?

EXPLICACIÓN:

Las grasas de origen vegetal tienen diferente grado de concentración, por lo que cada alimento que se ha preparado tendrá diferentes concentraciones. Con el procedimiento utilizado es posible determinar la presencia de grasa en un alimento observando una hoja de papel contra la luz.



Nombre del estudiante:




Q.F.B. Dinora Bernal Iribe

Revisado Fecha:


Práctica No. 10

ÁCIDOS NUCLÉICOS

INTRODUCCIÓN:

Los ácidos Nucléicos son grandes moléculas formadas por la repetición de una molécula unidad que es el nucleótido. Pero a su vez, el nucleótido es una molécula compuesta por tres:


  1. Una pentosa: ribosa y desoxirribosa

  2. Ácido fosfórico

  3. Una base nitrogenada, que puede ser una de estas cinco: adenina, guanina, citosina, timina, uracilo.

EXTRACCIÓN DE ADN


El objetivo fundamental de esta práctica es utilizar unas sencillas técnicas para poder extraer el ADN de un tejido animal y por el aspecto que presenta, confirmar su estructura fibrilar.

  1. A partir de la longitud enorme de las fibras también se confirma que en el núcleo el ADN se encuentra replegado.

MATERIAL Y REACTIVOS:

Higadito de pollo

1 Probeta

1 Varilla de vidrio

Alcohol de 96°

1 Mortero y mano

Cloruro sódico 2M

2 Vasos de precipitado de 200 ml.

SDS

1 Pipeta de 10 ml.

Arena

Jabón, franela

Trocito de tela de algodón p/ filtrar


an1

TECNICA:

1.- Triturar medio higadito de pollo en un mortero. Añadir arena para que al triturar se puedan romper las membranas de y queden los núcleos sueltos. Fig. 1
2.- Añadir al triturado, 50 centímetros cúbicos de agua. Remover hasta hacer una especie de papilla o puré.  Fig. 2

Fig.1 Fig.2

an4an2

3.- Filtrar varias veces sobre una tela para separar los restos de tejidos que hayan quedado por romper.  Fig.3
4.- Medir el volumen del filtrado con una probeta. Fig. 4
Fig.3 Fig. 4

an7an5

5.- Añadir al filtrado un volumen igual de cloruro sódico 2M. Con esto conseguimos producir el estallido de los núcleos para que queden libres las fibras de cromatina. Fig. 5
Fig.5 Fig.6an8an11

6.- A continuación se añade 1 centímetro cúbico de SDS. (Nota: Si no se dispone de este producto puede sustituirse por un detergente de vajillas, tipo Mistol o similar. Yo uso mistol y me va bien). La acción de este detergente es formar un complejo con las proteínas y separarlas del ADN. Así nos quedará el ADN libre de las proteínas que tiene asociadas.   Fig. 6

7.- Añadir mediante una pipeta 50 centímetros cúbicos de alcohol de 96º. Hay que hacerlo de forma que el alcohol resbale por las paredes del vaso y se formen dos capas. En la internase, precipita el ADN.  Fig. 7

8.- Introducir una varilla de vidrio e ir removiendo en la misma dirección. En la fotografía número 9 se indica con mayor precisión las capas. Sobre la varilla se van adhiriendo unas fibras blancas, visibles a simple vista, que son el resultado de la agrupación de muchas fibras de ADN.  Fig. 8

Fig.7 Fig.8

an14an9


9.- Esta práctica puede completarse con una tinción específica de ADN.
Tenemos que tomar una muestra de las fibras que se van depositando sobre la varilla de vidrio y depositarlas sobre un portaobjetos.
Teñir durante unos minutos con un colorante básico.


10.- Observar al microscopio.

anfases


Fig. 9

OBSERVACIONES Y CONCLUSIONES:


Nombre del estudiante:




Q.F.B. Dinora Bernal Iribe

Revisado Fecha:



Bioquímica Q.F.B Dinora Bernal Iribe

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