Evaluacion de dos metodos colorimetricos en base a aminofenazona y aminoantipirina para la deteccion de muestras de sangre en diferentes condiciones con fines forenses






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EVALUACION DE DOS METODOS COLORIMETRICOS EN BASE A AMINOFENAZONA Y AMINOANTIPIRINA PARA LA DETECCION DE MUESTRAS DE SANGRE EN DIFERENTES CONDICIONES CON FINES FORENSES

Nelly Coterhuanco Apaza, Sergio Quispe Mayta, Lily Salcedo ortiz 

1Catedra de Bioquímica, Facultad de Medicina, Universidad Mayor de San Andrés, Av. Saavedra, La Paz- Bolivia,

2Instituto de Investigaciones Forenses, La Paz - Bolivia
Keywords: Hemoglobin, Stains of blood, Aminofenazona, Aminoantipirina, Colorimetric Analysis

ABSTRACT

In this study we evaluate two colorimetric methods based on the aminofenazona and the aminoantipirina, to determine presence of blood in minimum concentrations by means of the hemoglobin, These experiments were carried out on different supports (cloths) exposed to environmental conditions environmental and time in which you/they were exposed. The tests showed high effectiveness in different supports for the sanguine groups O, A, B, AB and OR giving positive for blood until concentrations of 1/10.000. It is find organic interferentes as the juices of citric fruits and green vegetables that you/they can you cause false positive. Also you work with stains washed in which both methods detected blood in invisible stains, and finally the non absorbent supports that were buried by more time you is not able to detect presence of blood. / Se evaluaron dos métodos colorimétricos en base a pruebas de la aminofenazona y la aminoantipirina, para determinar presencia de sangre en concentraciones mínimas. Las pruebas se llevaron a cabo  sobre diferentes soportes (telas) expuestos a diferentes condiciones ambientales y de tiempo, a las cuales fueron expuestas. Las pruebas  mostraron alta sensibilidad  en diferentes soportes  para los grupos sanguíneos A, B, AB y O dando positivo para sangre hasta concentraciones de 1/10.000. En las manchas lavadas, ambas pruebas mostraron sensibilidad hasta el quinto lavado con diferentes detergentes. Se encontraron interferentes  orgánicos como los jugos  de frutas cítricas y vegetales verdes  que pueden ocasionas falsos positivos. Finalmente en los soportes  no absorbentes que fueron enterrados por mayor tiempo las pruebas fueron negativas.

Corresponding author: adri-nelly@hotmail.com
INTRODUCCIÓN

La  biología forense  involucra la identificación  y comparación  de  seres  vivos   mediante  el análisis   de   fluidos,   tejidos   y   estructuras biológicas  de las muestras forenses en la resolución  de  casos criminales.1 El reconocimiento, identificación, individualización y evaluación  de  la evidencia empleando     métodos    científicos  para    la resolución de aspectos relacionados con la ley es de vital importancia. Una de las evidencias mas importantes y mas común en una escena de  crimen  son  las manchas de sangre  que se pueden encontrar en diferentes soportes o sometidas a condiciones ambientales lo  cual es importante   para   la resolución   de aspectos relacionados con la ley.2 Las muestras sanguíneas tienen un alto contenido de eritrocitos y estos a su vez de hemoglobina, los métodos de detección de muestras sanguíneas se basa en detectar este ultimo elemento. En los países desarrollados se utiliza el luminol que requiere muestras concentradas y cuyo reactivo es de alto costo.3 En el presente estudio de orientación se ha evaluado la sensibilidad y especificidad de  dos métodos  colorimétricos en la detección de muestras sanguíneas sobre diferentes soportes y en diferentes condiciones ambientales, para ello se han utilizado dos sustratos  (aminofenazona y aminoantipirina), para implementarlos en forma rutinaria.

RESULTADOS  Y  DISCUSIÓN

Como se observa en la Tabla 1, el método de la aminofenazona mostró mayor sensibilidad en la detección de sangre  sobre diferentes soportes, dando positivo  hasta  1/10.000  para los grupos sanguíneos A, B y O con factores Rh (+)  e incluso hasta 1/50.000 para el grupo AB sobre el soporte de algodón, en relación al test de la Aminoantipirina que mostró positividad  hasta 1/5000 para grupos sanguíneos A;B;AB y O  con factores  Rh (+)  e incluso menor para el grupo AB  (hasta 1/1000). En el estudio de detección de sangre en muestras lavadas, como se observa en la Tabla Nº2, las pruebas fueron positivas hasta el décimo lavado para agua, agua y aceite, siendo las lavadas con jabón, detergente en polvo y lavandina positivas hasta el  quinto  lavado. Estos resultados son importantes por que las ropas manchadas de sangre  durante un acto violento  son generalmente lavadas para tratar de eliminar los vestigios.6

Tabla 1 : Sensibilidad de los test  de  aminofenazona  y aminoantipirina en la detección de sangre diluida sobre diferentes soportes

 

DILUCION

SANGRE

 

  GRUPO   A

 

GRUPO  B

 

   GRUPO   AB

 

GRUPO   O

Gasa

algodón

Papel

 filtro

Gasa

algodón

Papel

 filtro

Gasa

algodón

Papel

 Filtro

Gasa

algodón

Papel

 filtro

AMINOFENAZONA

1//10

+

+

+

+

+

+

+

+

+

+

+

+

1/100

+

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+

+

+

+

+

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1/500

+

+

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+

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1/1000

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+

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+

+

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+

+

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1/5000

+

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+

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+

+

+

+

+

1/10000

+

+

+

+

+

-

+

+

+

+

+

+

1/50000

-

-

-

-

-

-

-

+

-

-

-

+

AMINOANTIPIRINA

1//10

+

+

+

+

+

+

+

+

+

+

+

+

1/100

+

+

+

+

+

+

+

+

+

+

+

+

1/500

+

+

+

+

+

+

+

+

+

+

+

+

1/1000

+

+

+

+

+

+

+

+

+

+

+

+

1/5000

+

+

+

+

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-

+

-

+

+

+

1/10000

-

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-

+

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1/50000

-

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-

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-

-

-

 (+) = positivo  (-) = negativo

 

 

 

 

 

 

 

Tabla  2. Test  de aminofenazona y  aminoantipirina sobre manchas sanguineas  sometidas a lavados 

 

LAVADOS

 

 

NUMERO DE  LAVADOS

 

1

 

2

 

3

 

 

4

 

5

 

 

6

 

7

 

8

 

9

 

10

 

AGUA

Estado de la mancha*

v

v

v

v

v

v

v

pv

pv

pv

Aminofenazona

+

+

+

+

+

+

+

+

+

+

Aminoantipirina

+

+

+

+

+

+

+

+

+

+

 

DETER-GENTE  EN POLVO

Estado de la mancha*

v

v

v

pv

pv

i

i

i

i

I

Aminofenazona

+

+

+

+

+

+

-

-

-

-

Aminoantipirina

+

+

+

+

+

+

-

-

-

-

 

JABON

Estado de la mancha*

v

v

pv

pv

i

i

i

i

i

I

Aminofenazona

+

+

+

+

+

-

-

-

-

-

Aminoantipirina

+

+

+

+

-

-

-

-

-

-

 

LAVAN-DINA

Estado de la mancha*

v

v

pv

pv

i

i

i

i

i

I

Aminofenazona

+

+

+

+

+

+

-

-

-

-

Aminoantipirina

+

+

+

+

+

-

-

-

-

-

 

AGUA Y ACEITE

Estado de la mancha*

v

v

v

pv

pv

pv

pv

pv

i

I

Aminofenazona

+

+

+

+

+

+

+

+

+

+

Aminoantipirina

+

+

+

+

+

+

+

+

+

+
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